Eelplaanimisega seotud geneetilise diagnoosi (PGD) meetodi kirjeldus: tunnused ja tagajärjed

Eelmplantatsiooni geneetilise diagnoosi meetodit kasutatakse embrüo tervisliku seisundi hindamiseks, mis on saadud in vitro viljastamisega, enne emakakaela sisestamist emakaõõnes. Meetod võimaldab mitte ainult valida terve tulevase lapse, vaid ka suurendada raseduse võimalust. Seda tehnikat kasutatakse laialdaselt kõigis maailma kliinikes, mis tegelevad in vitro viljastamisega.

Üldised mõisted

Preimplantaat-geneetiline diagnoos võimaldab põhjalikku uurimist ja välistab kromosomaalsete kõrvalekallete esinemise üldiselt või ühe konkreetse kõrvalekalde. Hiljuti skriiniti geenid paralleelselt varakult, mis võib põhjustada kasvajate tekkimist täiskasvanueas (munasarjad, sooled, rindkeres).

Ema poolel genoomsete haiguste veo korral on enne viljastamist biopsiaga tegemist mitmete munarakkude polaarsete kehaosadega. Kirjeldatud meetodid on varase prenataalse diagnoosi alternatiiv, mis võimaldab hoiatada raseduse katkemise eest, kui lootel on äkki geneetilised patoloogiad.

Preimplanatsiooni geneetiline diagnoos võimaldab tulevase beebi sugu määrata juba sõeluuringu käigus. Seda kasutatakse soost tingitud kõrvalekallete tekke vältimiseks.

Kuidas geneetilised haigused pärinevad?

Erinevad pärilikud patoloogiad, mis on tekkinud domineeriva, retsessiivse ja x-seotud tüübi järgi.

Keda vaadata?

Preimplanatsiooni geneetiline diagnoos (PGD) tehakse järgmistel juhtudel:

1. Pärilike haiguste esinemine või muutused karüotüüpides ühes või mõlemas abielupaaris. Sageli tunnevad partnerid endid oma probleemidest harvemini - nad osalevad sõeluuringute käigus.
2. Harilik raseduse katkemine. Selle probleemiks ei ole vanemate anomaalid (need ei pruugi olla), vaid loote geneetilised mutatsioonid, mis põhjustavad katkemist.
3. IVF-i läbivate inimeste vanus on üle 38 aasta.
4. Anamneesis in vitro viljastamine üle 3 ebaõnnestunud katse.
5. Meeste viljatus.
6. ICSI (intratsütoplasmaatilise sperma süstimise) lisamine väetamisprogrammisse. Protsess on täis geneetiliste kõrvalekallete tekkimist embrüos.
7. Jalakäijate libisemise ajaloo juhtumid.

PGD funktsioonid

Eelneva geneetilise diagnoosi uuringud näitavad, et meetodil on olemas õigus eksisteerida, aitab kromosoomide kõrvalekallete diagnoosimiseks ja vältimiseks siiski vaja täiendavat paranemist.

PGD funktsioonid on järgmised:

• Katkestamise sagedus sõelumisel on madalam kui ilma selleta;
• Praegu ei ole tõendeid raseduse võimaluse suurenemise kohta;
• Võimalik on vale tulemus: embrüo on tervislik ja tulemus näitab kõrvalekaldeid, embrüo on haige ja uuring ütleb vastupidist (5-10% juhtudest).

Preimplantaadi geneetilise diagnoosi teostamine (blastomeeride kontroll)

Pärast kokkulepet in vitro viljastamise kohta hindab reproduktiivne ekspert, kas PGD-il on abielupaar. Kui on tõendeid, võivad partnerid protsessi kokku leppida või sellest keelduda. Siis allkirjastatakse uuringu läbiviimiseks loa andev dokument.

Kolmandal päeval alates embrüo viljastumisest võtab geneetikaan üks analüüsi jaoks moodustunud blastomeerrakke. Arvatakse, et lootel ei ole selle tagajärgi, sest kõik rakud on omavahel asendatavad.

Spetsialist tegeleb ühe eelnevalt valitud ala uurimisega: rakkude struktuuri uurimine spetsiaalse fluorestsentsmikroskoobi abil, DNA katsetamine, kasutades polümeraasi ahelreaktsiooni meetodit mutatsiooni olemasolu kindlakstegemiseks.

Tulemuse põhjal ei kasutata implantatsiooniprotsessis embrüoid, millel on kõrvalekaldeid. Valige terve ja kvaliteetne. Siis suunatakse üks või mitu emaka emakasse.

Kui polaarne keha on biopsia, uuritakse ema kromosoomi komplekti. Seda tehakse juhul, kui geneetiliselt kindlaks määratud patoloogia esinemine ilmneb naisliinil. Protseduur võimaldab teil määrata, kas munarakk on tervislik, mida kasutatakse väetamiseks, rikkudes selle struktuuri. Kui kõrvalekaldeid ei ole tuvastatud, võib seda kasutada väetamiseks ja emakaõõnesüstimiseks.

On juhtumeid, kus sõelutakse polaarsed kehad ja seejärel blastomeerid. See võimaldab teil saada usaldusväärsemat tulemust. Kavandatav skeem valib geneetika.

Kasutatud meetodid

Arvulised ja struktuurilised kromosoomide kõrvalekalded määratakse fluorestsentsi hübridisatsiooni teel. See meetod võimaldab teil raku DNA järjestust täiustada. Kasutatakse spetsiaalseid DNA-sonde, mis nende struktuuris on täiendavad piirkonnad blastomeeride DNA-tsoonide jaoks.

Sondil on nukleotiid ja fluorofoor (molekul, mis suudab fluorestseeruda). Kui DNA-sihtmärk interakteerub DNA-sondiga, moodustuvad valgustatud alad, mida vaadatakse fluorestsentsmikroskoobi all.

Kasutatakse ka PCR-i (polümeraasi ahelreaktsiooni) meetodit . See seisneb DNA-sektsiooni kopeerimises teatud laboratoorsete tingimustega ensüümidega.

Aneuploidsuse diagnoosimine

See on üks preimplantaat-geneetilisest diagnoosimisest, mis võimaldab tuvastada arvuliste kromosoomide kõrvalekallete esinemist (ebavajalike või puuduvate kromosoomide tuvastamiseks).

Geneetiline materjal koosneb 46-st kromosoomist, millest pool annab isa ja teine emaga. Kui embrüo saab täiendava kromosoomi, nimetatakse seda trisoomiks ja ükskõik milline kaotus on monosoomne. Need vead võivad põhjustada tagajärgi:

• Embrüo implantatsiooni puudumine;
• Raseduse spontaanne lõpetamine;
• Pärilikud patoloogiad (Downi sündroom, Klinefelter, Shereshevsky-Turner).

Naiste viljatus ja abielupaaride vanus on selliste kõrvalekallete tekkimise sagedased tegurid.

Monogeensete patoloogiate PGD

Monogeensete haiguste esinemise kindlakstegemiseks tehakse embrüote preimplanatsiooni geneetiline diagnoos perekondades, kus on kindlaks tehtud pärilikud anomaaliad. Kui abielupaaril on juba homogeense haigusega laps, kasvab mõni teine haige laps sünnitada.

Selle põhjuseks on teatud DNA piirkonna kromosoomide järjestuse rikkumine. Sellised haigused hõlmavad järgmist:

• Tsüstiline fibroos;
• Adrenogenitaalsündroom;
• Fenüülketonuuria;
• Hemofiilia;
• Paksrakuline aneemia;
• Wernig-Hoffmani sündroom.

Meetodi eelised ja riskid

Preimplantaatiline geneetiline diagnoos, mida peetakse mitmetähenduslikuks, on teatud eeliseid prenataalse sõeluuringu valdkonnas:

• Ainult kvalitatiivsed ja terved embrüod viiakse emakasse;
• Vähendab geneetiliste kõrvalekallete tekitamise ohtu;
• Abinõunemise oht on poole võrra vähenenud;
• Mitmekesisuse oht on poole võrra väiksem;
• Embrüo implantatsiooni võimalus suureneb 10% võrra;
• 20% suurendab lapse ohutu sünnituse võimalust.

Embrüo juhusliku kahjustamise oht PGD-s on 1%. Ebaõige tulemuse tõenäosus on 1:10, lisaks 3% tõenäosusest, et anomaaliaga embrüo hinnatakse tervena.

Tõenäosus, et terve embrüo hälbiv tulemus on 1:10. Võimalus 1: 5, et embrüo sissetoomine emakaõõnesse tühistatakse nende igasuguste kõrvalekallete tõttu.

Vastunäidustused

Preimplanatsiooni geneetiline diagnoos (PGD), mille tagajärjed embrüole ei ole täpselt identifitseeritud, on mitmeid vastunäidustusi:

• Embrüo killustumine üle 30% (normiks loetakse fragmentide moodustumist kuni 25%);
• Multinukleeritud blastomeeride olemasolu embrüos;
• Embrüo on selle arendamise kolmandal päeval vähem kui 6 blastomeeriga.

Meetodi ohutus

Diagnoos viiakse läbi tulevase organismi loomise varajases staadiumis, kui kõik selle rakud on polüpotentsed, see tähendab, et igaüks võib moodustada täieõigusliku tervisliku organismi.

PGD kõik etapid ei mõjuta embrüo, loote ja tulevase beebi. Pärast uuringu proovi saamist valmistatakse see erilisel viisil. Rakud asetatakse slaidile, millele need on fikseeritud, või puhverlahuses.

Menetluse maksumus

Preimplanatsiooni geneetiline diagnoos, mille maksumus varieerub vahemikus 50-120 tuhat rublat, näib esmapilgul kulukas manipuleerimine. Kuid lapse tervis ja ravi geneetiliselt määratud patoloogiatega maksab palju rohkem.

See protseduur annab kõik eelised naistele, kes olid võimelised lapse loomulikku kujunemist, kuna need ei ole selle diagnostilise meetodi jaoks kättesaadavad. Preimplanatsiooni geneetiline diagnoos, mille hind on võrreldes ekstrakorporaalse väetamisega iseenesest ebaoluline, teenib ainult täiendavat üldprogrammi, mis võimaldab mitte ainult kanda ja sünnitada, vaid ka kasvatada tervislikku last.